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La culture bactériologiquement pure des myxomycètes: techniques nouvelles.

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PARTIE SCIENTIFIQUE

LA CULTURE BACTERIOLOGIQUEMENT PURE DES MYXOMYCETES : TECHNIQUES NOUVELLES

par Marcel Locquin.

Les plasmodes — qu'ils proviennent d'un semis de spores, ou d'une récolte sur le terrain — sont habituellement accompagnés d'un cortège bactérien dont il est très difficile de les séparer. Pendant longtemps leur culture aseptique a paru impossible et Pinoy [4] avait même affir¬ mé que la présence de bactéries était indispensable à leur développe¬ ment. Cohen [1] est le premier, à notre connaissance, qui ait trouvé un moyen certain et reproductible, permettant, à la suite de migrations répétées sur plaque d'agar non nutritif, d'obtenir des plasmodes purs. Avant lui d'autres auteurs avaient bien prétendu obtenir des cultures pures, soit par stérilisation superficielle des spores avant leur germi¬ nation, soit par germination de spores très diluées, en se fiant au hasard pour obtenir des cultures pures. Mais à l aide de ces deux dernières méthodes nous n'avons jamais pu obtenir les résultats positifs -cités dans la littérature. Pendant longtemps, à la suite de ces échecs, nous n'avons utilisé que la méthode de Cohen qui donne des résultats cer¬ tains. Mais son application se trouve vite limitée. En effet le jeûne prolongé imposé aux plasmodes lors des 8 à 12 transferts qui sont en moyenne nécessaires n'est pas supporté par toutes les espèces. Seules les espèces très robustes telles Fuligo septica, Physarum polycephalum, supportent avec régularité un tel traitement. Les autres meurent d'ina¬ nition avant d'être purifiées.

. Désirant cultiver aseptiquement certaines espèces fragiles, nous avons mis au point plusieurs méthodes nouvelles.

Tout d'abord nous avons essayé la germination des spores et la cul¬ ture des plasmodes sur milieu gélosé-glucosé soumis au préalable à une irradiation prolongée aux rayons ultra-violets. Malheureusement les substances microbicides développées par l'irradiation, si elles res¬ pectent les champignons filamenteux, tuent les myxomycètes aussi bien que les bactéries.

Nous avons essayé ensuite la culture sur cellophane recouvrant une plaque de gélose nutritive ou non. Mais le plasmode, qui n'aime pas ce support, s'empresse d'atteindre les bords du disque pour rejoindre la gélose.

Nous avons eu un certain pourcentage de succès, par contre, avec les deux méthodes originales suivantes : migration sur verre et passage à travers des papiers-filtre superposés.

Une migration sur verre étant extrêmement délicate à obtenir, nous avons vite renoncé à l'employer aux fins de purification. Le passage à travers les papiers-filtre, phénomène connu de longue date, est relative¬ ment plus facile à obtenir et pendant un an nous l'avons utilisé avec un pourcentage appréciable de résultats intéressants mais malgré tout capricieux, ce qui ne permettait pas d'envisager une généralisation de son utilisation.

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